2.Ditambahkan ke dasar botol 2 ml larutan MnSO4 20% dan 2 ml reagen O2
3.Ditutup hati-hati jangan ada gelembung
4.Kocok hati-hati secara bolak-balik sampai terjadinya endapan
5.Diamkan, setelah endapan memisah, cairan yang jernih di buang
6.Tambahkan segera 2-5 ml H2SO4 Pekat melalui leher botol
7.Pindahkan ke dalam labu iod dan titrasi dengan Na2S2O3 Sampai warna kuning muda
8.Tambahkan amylum 0,2% sebanyak 2-3 tetes
9.Dititrasi lagi dengan Na2S2O3 sampai warna biru hilang.
Prosedur pengujian BOD (Biochemical oxygen demond)
1.Sampel BOD sebelum disaring diambil 50 ml sampel sementara setelah disaring diambil 125 ml
2.Kemudian angka tadi untuk memasukan sampel kedalam botol oksigen lalu diencerkan sampai penuh dan kemudian ditutup sampai tidak ada gelembung udara