Kemudian, 500 L ekstrak papain  ditambahkan ke tabung reaksi sampel, tetapi tidak ke tabung reaksi blanko. Kemudian larutan  dicampur dikocok dengan vorteks  dan diinkubasi selama 37 C selama 10 menit. Setelah inkubasi, 500 L sampel ekstrak papain adalah ditambahkan ke tabung reaksi kosong dan secara bersamaan, 5 mL larutan asam Trichloroacetic (TCA) ditambahkan ke dalam kedua tabung reaksi untuk menghentikan reaksi.
Larutan  diinkubasi selama 30 menit. Setelah inkubasi, 2 mL larutan disaring menggunakan filter kertas saring  ke tabung centrifuge kapasitas 10 mL. Setelah itu, 5 mL natrium karbonat ditambahkan ke dalam tabung centrifuge dan dicampur dengan puter dengan vorteks  diikuti oleh penambahan segera reagen Folin 1ml.
Kemudian, tabung diinkubasi pada suhu 37C selama 30 menit. Itu absorbansi larutan sampel diukur dengan a spektrofotometer menggunakan panjang gelombang 660 nm.
Larutan Tirosin digunakan sebagai standar dan larutan stoknya (10 mg / ml) disiapkan menggunakan larutan buffer. Stok diencerkan menjadi 200 g / mL, 400 g / mL, 600 g / mL dan 800 g / mL konsentrasi. Satu unit protease adalah didefinisikan sebagai jumlah kasein yang dihidrolisis untuk menghasilkan warna setara dengan 1,0 mole (181 g) tirosin per menit pada pH 7 dan 37 C (diwarnai oleh Folin dan Ciocalteu's reagen) dan dihitung kemudian dihitung aktivitas unit dan aktivitas spesifiknya. Moga bermanfaat *****
REFERENSI
- Santana, L. F., Inada, A. C., Espirito Santo, B. L. S. do, Fili, W. F. O., Pott, A., Alves, F. M., Hiane, P. A. (2019). Nutraceutical Potential of Carica papaya in Metabolic Syndrome. Nutrients, 11(7), 1608. doi:10.3390/nu11071608
- Urgessa, O. E., Itana, D. D., & Raga, T. O. (2019). Extraction of Papain from Papaya (Carica papaya L.) Fruit Latex and Its Application in Transforming Tannery Raw Trimming. Ethiopian Journal of Sciences and Sustainable Development, 6(2), 22-32.
- Sagadevan, P., Selvakumar, S., & Raghunath, M. (2019). Medicinal properties of Carica papaya Linn: Review. Madridge J Nov Drug Res, 3(1), 120-125.
Follow Instagram @kompasianacom juga Tiktok @kompasiana biar nggak ketinggalan event seru komunitas dan tips dapat cuan dari Kompasiana. Baca juga cerita inspiratif langsung dari smartphone kamu dengan bergabung di WhatsApp Channel Kompasiana di SINI