Percobaan, kedua menggunakan, ekstrak daun jambu biji yang difermentasi,( Coi et al., 2008), ekstrak itu diuji cobakan dalam sel makrofag tikus (RAW 264.7). Hasilnya adalah sel makrofaga mengalami pengurangan ekspresi enzim nitrit oksida sintase yang diinduksi lipopolisakarida dan tingkat protein siklooksigenase-2, dua mediator proinflamasi, melalui regulasi aktivitas transkripsi inti-faktor-B (NF-B).
Berkurangnya enzim nitrit oksida sintase, maka NO akan menurun. Nitrit oksida dibuat oleh enzim nitrit oksida sintase (NOS) melalui molekul L-arginin yang menghasilkan L-sitrulin dan Nitrit Oksida (NO).
Terdapat tiga (3) jenis isoform dari enzim ini yaitu: enzim sintase nitrit oksida endotel (eNOS), enzim sintase nitrit oksida neuron (nNOS) dan enzim sintase nitrit oksida (iNOS) terinduksi. Enzim sintase nitrit oksida endotel (eNOS) merupakan enzim yang aktivitasnya bergantung kalsium dan rangsangan terhadap enzim ini akan menghasilkan NO dalam jumlah sedikit. Enzim nitrit oksida sintase(iNOS) adalah enzim yang tidak bergantung kalsium dan diimbas oleh sitokin yang akan menghasilkan NO dalam jumlah banyak.
Artinya, Nitrit oksida yang dihasilkan eNOS berdampak perlindungan, karena menurunkan agregasi trombosit, mencegah adhesi leukosit, meningkatkan vasodilatasi pembuluh darah arteri dan mengatur ketegangan otot dinding pembuluh darah.
Dalam kepekatan fisiologis NO sangat berguna, tidak hanya untuk sistem vaskular, tetapi juga untuk yang terkait saraf dan imun. Nitrit oksida memegang peran penting dalam mengatur fungsi vaskular, menghambat agregasi platelet, menghambat proliferasi sel otot polos dan menjaga kesatuan struktur vaskular.
Mikroorganisme mengembangkan beberapa mekanisme untuk bertahan di lingkungan inang mereka. Mekanisme tersebut termasuk persaingan dengan inang untuk mendapatkan ion logam dan ketahanan terhadap pertahanan inang seperti NO, suatu senjata sitotoksik yang dihasilkan oleh makrofag. Makrofaga adalah,sel pada jaringan yang berasal dari sel darah putih yang disebut monosit. Monosit dan makrofag merupakan fagosit, berfungsi terutama pada pertahanan tidak spesifik.
Dalam makrofag, inducible NO sintase (iNOS atau NOS2) dihasilkan setelah diaktifkan oleh endotoksin atau sitokin dan menghasilkan jumlah NO yang berlebihan yang diduga dapat membantu membunuh atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme penyerang atau jaringan neoplastik.
Aktivitas biologis ini juga dilaporkan dalam pekerjaan lain. Secara singkat, Jang et al. mengevaluasi produksi prostaglandin E 2 menemukan bahwa efek penghambatan sangat berkorelasi dengan konten fenolik total. Kaileh et al. menyarankan agar penindasan faktor nuklir-B bisa berada pada level transkripsional karena kurangnya pengikatan antara faktor-B nuklir dan DNA dalam murine fibrosarcoma (L929sA) dan dua garis sel kanker payudara (MDA-MB231 dan MCF7).
Pada saat yang sama, Jang et al. [2015] menemukan bahwa lipopolisakarida dapat diinduksi produksi nitrat oksida dan prostaglandin E2 adalah karena kemampuan ekstrak daun jambu biji untuk menekan fosforilasi dalam ekspresi protein. Fosforilasi adalah penambahan gugus fosfat pada suatu protein atau molekul organik lain. Fosforilasi dapat meningkatkan efisiensi katalitik enzim, mengubahnya menjadi bentuk aktifnya dalam satu protein.
Selain itu, Sen et al. memverifikasi penghambatan inti aktivasi faktor-kb dalam makrofag dari ginjal Labeo rohita oleh fraksi flavonoid daun jambu biji ekstrak dan Jang et al. Meningkatkan penghambatan lipopolisakarida yang diinduksi prostaglandin E 2 dan produksi oksida nitrat dengan mengoptimalkan kondisi ekstraksi. Selanjutnya, metanol dan etanol ekstrak daun juga menunjukkan penghambatan lisis eritrosit yang diinduksi hipotonisitas.
Sementara itu, Laily et al. [2015] menyarankan penggunaan daun jambu biji sebagai agen stimulan kekebalan tubuh, karena dapat menunjukkan kemampuan memodulasi respon proliferasi limfosit. Hasil untuk kegiatan ini, mengkonfirmasi potensi daun jambu biji sebagai anti inflamasi pengobatan dan sebagai agen stimulasi sistem kekebalan tubuh.
